目的:观察羊膜不同保存方法及保存时间对PEDF含量的影响。
方法:取健康剖宫产产妇胎盘,无菌操作下剥取羊膜,称湿重后剪成约1.0x 1.0 cm2大小,按保存方法不同随机分成四组,A组:-70℃DMEM+甘油(1:1)保存法,B组:4℃DMEM+甘油(1:1)保存法,C组:-70℃甘油保存法,D组:4℃甘油保存法,每组30块。分别保存1、2、4、6、8周后,取出保存的羊膜,采用低温超声粉碎并匀浆,离心提取上清液, ELISA法检测其PEDF含量,同时取新鲜羊膜作为对照。
结果:①新鲜羊膜PEDF含量为6.5245±0.4921 mg/L,与四种保存方法保存1周的羊膜PEDF含量比较差异具有显著性(p<0.05); ② 随着保存时间的延长,四种保存方法保存羊膜中PEDF含量不断下降。-70℃DMEM+甘油(1:1)保存方法组PEDF含量较其他保存方法组下降缓慢。
结论:人羊膜匀浆提取液中含有丰富的抗新生血管增生抑制因子PEDF,其中新鲜羊膜较保存羊膜中PEDF含量更高。保存羊膜中PEDF含量随保存时间延长而不断下降,其中以-70℃DMEM+甘油(1:1)保存方法对PEDF含量影响相对较小。
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