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高效液相色谱法测定兔眼玻璃体两性霉素B         
高效液相色谱法测定兔眼玻璃体两性霉素B
作者:刘爱明、… 文章来源:山东省眼科研究所 266071 点击数: 更新时间:2004-5-28
目的 建立高效液相色谱法测定新西兰大白兔眼玻璃体两性霉素B。 方法 兔眼玻璃体标本100μL经过冷冻干燥后,加入乙睛-水(70:30)20μL去蛋白并溶解浓缩回收目标药物,13000rcf离心5min,取10μL进行样本色谱分析。色谱条件为流动相乙睛-10mMNaH2PO4溶液(35:65),流速0.20mL/min, C18色谱柱,柱温25℃,检测波长410nm。 结果 两性霉素B在3~500ng/mL内线性关系良好(r=0.99883),高、中、低三种浓度的方法回收率为(99~108)%,绝对回收率为(83~93)%;日内、日间RSD分别为(3.1~12.6)%、(3.8~12.9)%;检测灵敏度1ng/mL。 结论 标本前处理方法可以有效去除生物基质中的蛋白,同时保证了理想的回收,不对色谱柱造成损害,适用于兔眼玻璃体两性霉素B的定量分析,过程简单,方法稳定,结果可靠。
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